Fenilgalaktozid CAS:2818-58-8

Utjecaj na aktivnost enzima: Fenilgalaktozid se obično koristi za mjerenje aktivnosti enzima β-galaktozidaze.Kada se fenilgalaktozid hidrolizira β-galaktozidazom, oslobađa p-nitrofenol.Akumulacija p-nitrofenola može se kvantitativno izmjeriti, pružajući uvid u aktivnost β-galaktozidaze.Ovaj efekat se koristi u aplikacijama kao što su enzimski testovi i sistemi skrininga.

Analiza ekspresije gena: Fenilgalaktozid se često koristi kao supstrat u eksperimentima molekularne biologije za proučavanje ekspresije gena.Gen lacZ, koji kodira β-galaktozidazu, obično je spojen sa regulatornim sekvencama drugih gena od interesa.Ekspresija lacZ gena i hidroliza fenilgalaktozida pomoću β-galaktozidaze mogu ukazivati ​​na obrazac ekspresije i nivo ciljnog gena koji se proučava.

Sistemi skrininga: Fenilgalaktozid je važna komponenta sistema za skrining koji koriste aktivnost β-galaktozidaze.Jedan široko poznat primjer je plavo-bijeli skrining metod, koji se koristi za identifikaciju rekombinantnih ili transformiranih ćelija u eksperimentima molekularne biologije.Kolonije koje su uspješno preuzele rekombinantnu DNK ili su prošle genetsku rekombinaciju će eksprimirati β-galaktozidazu, što će dovesti do hidrolize fenilgalaktozida i stvaranja plave boje.

Pročišćavanje proteina: U nekim slučajevima, fenilgalaktozid se može koristiti kao ligand za afinitetnu hromatografiju za pročišćavanje proteina koji se specifično vezuju za β-galaktozidazu ili ih aktivira.Protein od interesa može imati oznaku afiniteta ili fuzionu oznaku koja sadrži domen koji se vezuje za β-galaktozidazu.Propuštanjem mješavine proteina kroz kolonu s imobiliziranim fenilgalaktozidom, željeni protein se može selektivno zadržati i potom eluirati.