IPTG CAS:367-93-1 Cijena proizvođača
Izopropil β-D-1-tiogalaktopiranozid (IPTG) je sintetički analog laktoze koji se obično koristi u istraživanju molekularne biologije i biotehnološkim aplikacijama.IPTG se prvenstveno koristi za indukciju ekspresije gena u bakterijskim sistemima, gdje služi kao molekularni okidač za iniciranje transkripcije ciljnih gena.
Kada se doda u medijum za rast, IPTG preuzimaju bakterije i može se vezati za protein represora lac, sprečavajući ga da blokira aktivnost lac operona.Lac operon je skup gena uključenih u metabolizam laktoze, a kada se ukloni represorski protein, geni se eksprimiraju.
IPTG se često koristi zajedno sa lacUV5 mutantnim promotorom, koji je konstitutivno aktivna verzija lac promotora.Kombinacijom IPTG indukcije sa ovim mutantnim promotorom, istraživači mogu postići visok nivo ekspresije gena.Ovo omogućava proizvodnju velikih količina proteina za prečišćavanje ili druge daljnje primjene.
Pored ekspresije gena, IPTG se takođe često koristi u testovima plavo/belog skrininga.U ovoj tehnici, lacZ gen je tipično spojen sa genom od interesa, a bakterije koje uspješno eksprimiraju ovaj fuzioni gen će proizvesti aktivni enzim β-galaktozidaze.Kada se IPTG doda zajedno sa hromogenim supstratom kao što je X-gal, bakterije koje eksprimiraju fuzioni gen postaju plave zbog aktivnosti β-galaktozidaze.Ovo omogućava identifikaciju i selekciju rekombinantnih sojeva koji su uspešno integrisali gen od interesa.
Indukcija ekspresije gena: IPTG se obično koristi za indukciju ekspresije ciljnih gena u bakterijskim sistemima.Imitira prirodni induktor laktoze i vezuje se za protein represor lac, sprečavajući ga da blokira lac operon.Ovo omogućava transkripciju i ekspresiju željenih gena.
Ekspresija i pročišćavanje proteina: IPTG indukcija se često koristi za proizvodnju velikih količina rekombinantnih proteina za različite svrhe, kao što su biohemijske studije, terapeutska proizvodnja ili strukturna analiza.Koristeći odgovarajuće vektore ekspresije i indukciju IPTG, istraživači mogu postići visoke nivoe proizvodnje ciljnog proteina u bakterijskim domaćinima.
Plavo/bijelo skrining: IPTG se često koristi u kombinaciji sa lacZ genom i hromogenim supstratom, kao što je X-gal, za plavo/bijelo skrining testove.Gen lacZ je tipično spojen sa genom od interesa, a bakterije koje uspješno eksprimiraju ovaj fuzioni gen će proizvesti aktivni enzim β-galaktozidaze.Kada se dodaju IPTG i hromogeni supstrat, rekombinantni sojevi koji eksprimiraju fuzioni gen postaju plavi, što omogućava laku identifikaciju i selekciju.
Proučavanje regulacije gena: IPTG indukcija se obično koristi u istraživanju za proučavanje regulacije gena i operona, posebno lac operona.Manipulisanjem koncentracijama IPTG-a i praćenjem ekspresije komponenti lac operona, istraživači mogu istražiti mehanizme regulacije gena i ulogu različitih faktora ili mutacija.
Sistemi ekspresije gena: IPTG je ključna komponenta u nekoliko sistema ekspresije gena, kao što su sistemi zasnovani na T7 promotorima.U ovim sistemima, lac promotor se često koristi za pokretanje ekspresije T7 RNK polimeraze, koja, zauzvrat, transkribuje ciljne gene pod kontrolom sekvenci T7 promotora.IPTG se koristi za indukciju ekspresije T7 RNA polimeraze, što dovodi do aktivacije ekspresije ciljnog gena.
| Kompozicija | C9H18O5S |
| Test | 99% |
| Izgled | Bijeli prah |
| CAS br. | 367-93-1 |
| Pakovanje | Mali i veliki |
| Rok trajanja | 2 godine |
| Skladištenje | Čuvati na hladnom i suvom mestu |
| Certifikat | ISO. |
